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| Cancer Cell：p53突變影響天然免疫信號并促進腫瘤的免疫逃逸 | ||||||||||||||||||||||
| [ 來源：轉(zhuǎn)載自網(wǎng)絡(luò) 發(fā)布日期：2021-04-15 09:45:52 責(zé)任編輯： 瀏覽次 ] | ||||||||||||||||||||||
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p53突變（mtp53）是眾所周知的促癌基因。在最近一項研究中，來自Stony Brook大學(xué)的Luis A. Martinez團隊報告了一種新的機制，通過該機制，mtp53抑制細胞自主和非細胞自主信號，從而促進癌細胞存活和逃避腫瘤免疫監(jiān)視。相關(guān)結(jié)果發(fā)表在最近的《Cancer Cell》雜志上。
為了確定mtp53是否調(diào)節(jié)先天性免疫信號通路，作者最初在人乳腺癌細胞BT549（p53R249S）和MDA-MB-231（p53R280K）和胰腺細胞株MIA PaCa-2（p53R248W）（人源）和KPC（p53R172H）（鼠源）進行了shRNA介導(dǎo)的mtp53敲低。在所有四個細胞系中，作者觀察到mtp53敲低導(dǎo)致TBK1及其底物IRF3和STING磷酸化。盡管小鼠和人p53靶向序列是不同的，但它們都產(chǎn)生相似的反應(yīng)。此外，作者嘗試了其它兩種不同的p53 shRNA，同樣發(fā)現(xiàn)其能夠在MDA-MB-231細胞中也誘導(dǎo)TBK1底物磷酸化，從而排除了shRNA脫靶效應(yīng)。此外，通過比較來自p53-/-或mtp53（p53R172H / R172H）小鼠模型的小鼠胚胎成纖維細胞（MEF），作者發(fā)現(xiàn)mtp53與TBK1，IRF3和STING的磷酸化降低相關(guān)。在此基礎(chǔ)上，作者構(gòu)建了4T1小鼠乳腺癌細胞系（其缺乏p53基因）以表達R249S 突變的mtp53，發(fā)現(xiàn)這些細胞的TBK1底物磷酸化水平降低。 mtp53（R280K）在兩種不同類型的正常人成纖維細胞中過表達，同樣降低了TBK1及其底物IRF3和STING的磷酸化。這些數(shù)據(jù)表明，mtp53具有阻斷先天免疫信號通路的活性。 與mtp53相反，在人類肺癌A549細胞中利用shRNA敲低野生型p53的表達水平，導(dǎo)致STING，TBK1和IRF3的磷酸化降低。此外，誘導(dǎo)表達野生型p53的人肺癌H1299細胞中觀察到TBK1，STING和IRF3磷酸化增加。這些蛋白質(zhì)的磷酸化可能反映了IFI16在p53介導(dǎo)下的活性，其與cGAS協(xié)同作用激活TBK1-STING-IRF3信號。然而，IFI16水平不受不同細胞系中mtp53敲低或過表達的影響，因此，野生型p53和mtp53在先天免疫信號傳導(dǎo)途徑的控制中以相反的方式起作用。 在先天免疫途徑激活后，STING和IRF3會重新定位到不同的細胞內(nèi)區(qū)間，因此作者研究了mtp53是否改變了其亞細胞定位。對STING和ERGIC的染色表明，STING在高爾基體中的定位與先前報道的觀察結(jié)果一致，即它在癌細胞中具有活性。此外，數(shù)據(jù)顯示cGAS和STING敲低可降低TBK1和IRF3磷酸化。重要的是，在BT549和MDA-MB-231細胞中用cGAMP處理可以進一步提高STING和ERGIC的共定位。 接下來，作者檢查了mtp53是否控制IRF3易位。 IRF3在未刺激的細胞中存在于細胞質(zhì)中，但在激活STING / TBK1 / IRF3途徑后，它會轉(zhuǎn)移至細胞核。為了評估m(xù)tp53是否調(diào)節(jié)IRF3的亞細胞定位，作者在具有強力霉素誘導(dǎo)的mtp53R248W的H1299細胞中穩(wěn)定表達了GFP-IRF3。在未誘導(dǎo)的細胞中，GFP-IRF3存在于細胞質(zhì)中，經(jīng)過HT-DNA處理后，約90％的細胞中GFP-IRF3轉(zhuǎn)移至細胞核中。相反地，mtp53表達減弱了GFP-IRF3對HT-DNA處理的反應(yīng)，細胞核內(nèi)GFP-IRF3的比例不到20％。綜合數(shù)據(jù)表明，mtp53能夠阻礙IRF3的核易位。 胞質(zhì)DNA信號能夠激活I(lǐng)RF3，進而誘導(dǎo)相應(yīng)的轉(zhuǎn)錄過程。與此同時，DNA信號也誘導(dǎo)IRF3依賴性細胞死亡，即IRF3與BAX相互作用并促進線粒體孔的形成和凋亡。作者發(fā)現(xiàn)，經(jīng)HT-DNA處理24小時的H1299細胞中大約40％出現(xiàn)凋亡，而上述現(xiàn)象在shRNA介導(dǎo)的IRF3敲除后不再出現(xiàn)，表明細胞對HT-DNA誘導(dǎo)的凋亡反應(yīng)是IRF3依賴性的。為了研究mtp53是否能夠抑制這種凋亡反應(yīng)，作者在MDA-MB-231細胞中敲低mtp53并用HT-DNA處理。 結(jié)果表明，HT-DNA處理可誘導(dǎo)約30％的對照細胞凋亡，而mtp53敲低細胞的凋亡反應(yīng)更為明顯。另外，將mtp53敲除和IRF3敲除相結(jié)合，可將凋亡反應(yīng)降低至20％�？傮w而言，這些數(shù)據(jù)表明表達mtp53的細胞未能激發(fā)對cGAS / STING / TBK1 / IRF3途徑活化的細胞天然免疫反應(yīng)。最后，作者發(fā)現(xiàn)mtp53能夠抑制TBK1-STING-IRF3復(fù)合體的形成，從而從分子機制層面揭示了其負向調(diào)節(jié)天然免疫信號的原因。 綜上，作者發(fā)現(xiàn)Mtp53干擾了激活先天免疫反應(yīng)中細胞質(zhì)DNA介導(dǎo)的cGAS-STING-TBK1-IRF3的信號傳遞。 揭示了腫瘤細胞抵抗免疫監(jiān)視的內(nèi)在原因，并未未來的腫瘤免疫治療提供了新的思路。 鄭重聲明：本文版權(quán)歸原作者所有，轉(zhuǎn)載文章僅為傳播更多信息之目的，如作者信息標記有誤，請第一時間聯(lián)系我們修改或刪除。 | ||||||||||||||||||||||
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